Reporter Assay – Definisi dan Cara Kerjanya

Reporter Assay – Definisi dan Cara Kerjanya

Reporter assay – adalah teknik dalam biologi molekuler yang digunakan untuk mengukur aktivitas gen atau elemen regulasi genetik. Bayangkan seperti memasang lampu kecil pada sebuah saklar. Jika lampu menyala, itu berarti saklar sedang aktif. Begitu pula dengan reporter assay, kita “menempelkan” gen pelapor (reporter gene) pada gen yang ingin kita amati. Jika gen target aktif, maka gen pelapor juga akan aktif dan menghasilkan sinyal yang dapat kita deteksi.

Cara Kerja Reporter Assay

• Membuat Konstruksi Genetik:

  • Gen target: Gen yang ingin kita pelajari aktivitasnya.
  • Promoter: Bagian DNA yang mengontrol kapan dan seberapa banyak gen akan diekspresikan.
  • Gen reporter: Gen yang menghasilkan produk yang mudah dideteksi, seperti protein fluoresen atau enzim.
  • Vector: Molekul DNA yang digunakan sebagai kendaraan untuk membawa konstruksi genetik ke dalam sel.

  Konstruksi genetik ini kemudian dimasukkan ke dalam sel yang akan dipelajari.

• Ekspresi Gen: Jika promoter dari gen target aktif, maka gen reporter juga akan terekspresi dan menghasilkan produknya.

• Deteksi Produk Reporter: Produk dari gen reporter kemudian dideteksi menggunakan metode yang sesuai. Misalnya:

  • Protein fluoresen: Diamati menggunakan mikroskop fluoresen.
  • Enzim: Diukur aktivitasnya menggunakan substrat spesifik yang menghasilkan perubahan warna atau cahaya.

Reporter Assay memiliki banyak kegunaan dalam biologi molekuler yang dapat di implementasikan ke berbagai aplikasi seperti :

• Biologi sel: Mempelajari fungsi gen, jalur sinyal, dan interaksi protein-protein.
• Farmakologi: Menemukan obat baru dan mengevaluasi efektivitas obat.
• Bioteknologi: Mengembangkan organisme yang menghasilkan produk bernilai tinggi.

Selain itu menggunakan Reporter Assay juga memiliki beberapa keunggulan seperti :

• Sensitif: Dapat mendeteksi perubahan ekspresi gen yang sangat kecil.
• Spesifik: Dapat mengukur ekspresi gen yang spesifik.
• Kuantitatif: Hasilnya dapat diukur secara kuantitatif.
• Visual: Beberapa reporter memungkinkan visualisasi langsung dari ekspresi gen.

 

Promega menyediakan berbagai sistem deteksi yang disesuaikan dengan kebutuhan penelitian Reporter Assay tertentu :

– Uji Homogen (ditambahkan langsung ke kultur sel tanpa persiapan lisat) : Ideal untuk aplikasi dengan hasil tinggi dan analisis kinetik.

Contoh: Nano-Glo®, Dual-Glo®, ONE-Glo™, dan Steady-Glo

 

– Uji Non-Homogen (memerlukan persiapan lisat): Terbaik untuk sensitivitas maksimum.

 

Contoh: Sistem Uji Reporter Dual-Luciferase® (DLR™).

 

– Uji Sel Hidup (deteksi dalam sel hidup tanpa lisis): Cocok untuk pengamatan kinetik jangka panjang.

Contoh: Nano-Glo® Endurazine™, Nano-Glo® Vivazine™, dan EnduRen™.

 

PT. Indolab Utama Distributor Alat Kesehatan yang menyediakan berbagai kebutuhan Laboratorium anda. Untuk Info lebih lengkap dapat klik icon Whatsapp untuk, support@indolabutama.com atau kunjungi Instagram @indolab_utama untuk mengetahui katalog product terbaru dan promo menarik.