Spectrophotometer: Pengertian, Prinsip, dan Jenisnya

Pengertian Spectrophotometer

Spektrofotometer merupakan alat laboratorium yang menggunakan prinsip spektrofotometri untuk pengukuran kuantitatif analisis kimiawi. Spektrofotometri itu sendiri adalah gabungan dari dua prinsip yaitu spektrometri dan fotometri.

Secara keseluruhan, spektrofotometri menggunakan hukum Lambert-Beer untuk memperoleh nilai konsentrasinya. Instrumen ini mendeteksi besarnya konsentrasi suatu bahan dengan melewatkan suatu cahaya dan mengukur intensitas absorbansinya. Radiasi elektromagnetik ini berkisar di panjang gelombang tertentu dan spektrofotometri mengukur seberapa besar sampel mengabsorpsi atau mentransmisi gelombang tersebut.

Spektrofotometer umumnya digunakan untuk analisis kimia seperti reaksi enzim katalitik, menguji warna, atau menguji darah atau jaringan pada uji klinis.

Berdasarkan cahaya yang digunakan, spektrofotometer dibagi menjadi beberapa jenis:

• Ultraviolet (UV): Menggunakan cahaya ultraviolet dengan range 186 – 400 nm.
• Visible (Vis): Menggunakan cahaya visible dengan range 400 – 700 nm.
• Ultraviolet-Visible (UV-Vis): Menggunakan kedua cahaya gabungan dari spektrofotometer UV dan Vis untuk jangkauan panjang gelombang yang lebih luas.
• Infrared (IR): Menggunakan cahaya infrared dengan range 700 – 15000 nm.

Berdasarkan jumlah sumber cahayanya, spektrofotometer dibagi lagi menjadi 4 jenis:

• Single Beam: Merupakan spektrofotometer yang paling sederhana dan hanya memancarkan cahaya dari satu sumber.
• Double Beam: Satu sumber cahaya dapat melewati dua sampel kuvet sekaligus sebelum ke detektor.
• Dual Beam: Memiliki dua detektor untuk dua sampel kuvet.
• Ratio Beam: Hanya dapat mengukur satu sampel kuvet, namun memiliki hasil dengan stabilitas yang optimal.

Cara Kerja Spektrofotometer

Berikut adalah gambaran dari skema spektrofotometer:

Gambar 1  Skema spektrofotometer

Seperti yang sudah disebutkan di atas, spektrofotometer menghasilkan nilai konsentrasi suatu bahan yang diukur. Pada Gambar 1, ditampilkan bahwa kuvet yang berisi sampel diletakkan di antara sumber cahaya dan detektor. Cahaya melewati monokromator berbentuk prisma untuk diuraikan menjadi panjang gelombang tertentu yang diinginkan operator dan menembus kuvet sampel. Sampel yang menyerap cahaya tersebut akan diteruskan untuk dipantulkan dan dipancarkan ke detektor untuk dianalisis. Detektor akan mengubah cahaya menjadi sinyal listrik untuk ditampilkan dalam bentuk angka pada layer monitor.

Indolab Utama menawarkan dua brand spektrofotometer dengan variasi keperluan:

1. Biochrome:

• Libra

Tipe Libra memiliki berbagai jenis spektrofotometer seperti jenis double beam, UV/Vis, dan Visible. Spektrofotometer Libra sudah termasuk built in software dan layar touch screen yang memudahkan pengguna. Panjang gelombangnya berada di sekitar 190 – 1100 nm.

Gambar 2  Libra

• Biowave

Biowave 3 dan 3+ merupakan spektrofotometer UV/Vis split beam dengan panjang gelombang 190-1100 nm. Biowave menggunakan lampu Xenon yang tahan lama dan biaya running yang kecil. Desain Biowave kompak dan ringan sehingga mudah untuk disimpan di mana saja.

 Gambar 3  Biowave

• BioDrop

Berikut adalah spektrofotometer BioDrop:

Gambar 4  BioDrop

BioDrop produksi Biochrome memiliki 2 jenis, yaitu Biodrop µLite+ dan Biodrop Duo+. Biodrop merupakan microvolume spectrophotometer, yang dapat mendeteksi sampel dari ukuran yang sangat kecil yaitu 0.5 – 5 µL.

• • BioDrop µLite+

BioDrop µLite+ memiliki microvolume port yang dapat mendeteksi hingga sampel sebesar 1 µL. Port tidak butuh dipindah-pindahkan sehingga tidak butuh pengkondisian-ulang atau kalibrasi jika ingin digunakan kembali, menjaga akurasi dan konsistensi dari hasil.

• • BioDrop Duo+

BioDrop Duo+ memiliki 2 port sampel, yaitu: standard cuvette port dan microvolume port. Dengan panjang gelombang 190 – 1100 nm, BioDrop Duo+ ini mampu mendeteksi hingga sampel sebesar 1 µL. Kestabilan sampel port menjadi kunci penting Biodrop Duo+ menghasilkan stabilitas dan hasil yang akurat dengan panjang gelombang yang spesifik hingga +/- 5µm. Operasi yang sangat cepat, dapat mengukur sampel DNA dalam 4 detik dan dapat dikoneksi dengan USB untuk eksportasi data. Biodrop Duo+ menggunakan lampu Xenon dengan konfigurasi split beam. Instrumen ini dapat diaplikasikan ke DNA, RNA, oligo, pewarna fluoresens, kalkulasi Tm, pewarna protein, protein UV, dan metode protein colorimetric.

2. Optima

Spektrofotometri Optima yang berasal dari Jepang menyediakan dua jenis spektrofotometer berdasarkan cara penggunaannya, yaitu manual dan digital:

• Manual (SP-300)

SP-300 merupakan spektrofotometer manual yang memiliki range panjang gelombang 320 – 1000 nm. Sumber cahaya yang digunakan tipe ini adalah dari lampu Tungsten Halogen dan data processing menggunakan microprocessor.

Gambar 5  SP-300

• Digital (SP-3000 Nano)

Tipe ini merupakan merupakan spektrofotometer digital UV-Vis yang memiliki 8 multi cell holder dalam bentuk rotary. Spektrofotometer ini merupakan single beam dengan panjang gelombang 190 – 1100 nm dengan lampu D2 yang bergaransi 2500 dalam 2 jam.

Gambar 6  SP-3000 Nano

PT. Indolab Utama Distributor Alat Kesehatan yang menyediakan berbagai kebutuhan Laboratorium anda. Untuk Info lebih lengkap dapat klik icon Whatsapp untuk, support@indolabutama.com atau kunjungi Instagram @indolab_utama untuk mengetahui katalog product terbaru dan promo menarik.